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带你认识脂质体

发布时间:2024-01-02 分享至:

脂质体(Liposome)也称为微脂粒,应用包裹技术,可制备一种具有脑靶向给药功能的新型药物制剂。脂质体是利用双分子层膜所形成的囊泡包裹药物分子而形成的制剂。由于生物体质膜的基本结构也是磷脂双分子层膜,脂质体具有与生物体细胞相类似的结构,因此有很好的生物相容性。脂质体进入人体内部之后会作为一个“入侵者”而启动人体的免疫机制,组织中靶向性地富集,这就是脂质体的被动靶向性。

通过在脂质体膜中掺入一些靶向物质,可以使脂质体在生物或者物理因素的引导下向特定部位靶向集中,这就是主动靶向脂质体,目前已经出现的脂质体主动靶向机制有:热敏脂质体、磁导向脂质体和抗体导向脂质体等。脂质体是由磷脂与(或不)与附加剂为骨架膜材制成的具有双分子层结构的封闭囊状体。常见的磷脂分子结构中有两条较长的疏水烃链和一个亲水基团,将适量的磷脂加至水或缓冲溶液中,磷脂分子定向排列,其亲水基团面向两侧的水相,疏水的烃链彼此相对缔和为双分子层,构成脂质体。用于制备脂质体的磷脂有天然磷脂,如豆磷脂、卵磷脂等;合成磷脂,如二棕榈酰磷脂酰胆碱,二硬脂酰磷脂酰胆碱等。常用的附加剂为胆固醇。胆固醇也是两亲性物质,与磷脂混合使用,可制得稳定的脂质体,其作用是调节双分子层的流动性,减低脂质体膜的通透性。其他附加剂有十八胺、磷脂酸等,这两种附加剂能改变脂质体表面的电荷性质,从而改变脂质体的包封率、体内外其他参数。

脂质体可分为三类:小单室(层)脂质体,粒径为20~50nm,经超声波处理的脂质体,绝大部分为小单室脂质体;多室(层)脂质体,粒径约为400~3500nm,显微镜下可观察到尤如洋葱断面或人手指纹的多层结构;大单室脂质体,粒径约为200~1000nm,用乙醚注入法制备的脂质体多为这一类。脂质体的制法有多种,根据药物的性质或需要进行选择。(1)薄膜分散法:这是一种经典的制备方法,它可形成多室脂质体,经超声处理后得到小单室脂质体。此法优点是操作简便,脂质体结构典型,但包封率较低。(2)注入法:有乙醚注入法和乙醇注入法等。“乙醚注入法”是将磷脂等膜材料溶于乙醚中,在搅拌下慢慢滴于55~65℃含药或不含药的水性介质中,蒸去乙醚,继续搅拌1~2h,即可形成脂质体。(3)逆相蒸发法:系将磷脂等脂溶性成分溶于有机溶剂,如氯仿中,再按一定比例与含药的缓冲液混合、乳化,然后减压蒸去有机溶剂即可形成脂质体。该法适合于水溶性药物、大分子活性物质,如胰岛素等的脂质体制备,可提高包封率。(4)冷冻干燥法:适于在水中不稳定药物脂质体的制备。(5)熔融法:采用此法制备的多相脂质体,其物理稳定性好,可加热灭菌。

在制备含药脂质体时,根据药物装载的机理不同,可分为“主动载药” 与“被动载药”两大类 。所谓“主动载药”,即通过内外水相的不同离子或化合物梯度进行载药,主要有K+-Na+梯度和H+梯度(即pH梯度)等。传统上,人们采用***多的方法是“被动载药”法。所谓“被动载药” ,即首先将药物溶于水相或有机相(脂溶性药物) 中,然后按所选择的脂质体制备方法制备含药脂质体,其共同特点是:在装载过程中脂质体的内外水相或双分子层膜上的药物浓度基本一致,决定其包封率的因素为药物与磷脂膜的作用力、膜材的组成、脂质体的内水相体积、脂质体数目及药脂比(药物与磷脂膜材比)等。对于脂溶性的、与磷脂膜亲和力高的药物,“被动载药”法较为适用。而对于两亲性药物,其油水分配系数受介质的pH值和离子强度的影响较大,包封条件的较小变化,就有可能使包封率有较大的变化。

生产定制各种脂质体和脂质纳米粒子(LNPs)。包括各种空白对照脂质体,靶向脂质体,载药脂质体,装载DNA或小分子脂质体,长循环脂质体,阳离子脂质体,荧光脂质体,抗体修饰脂质体及其他特殊复杂的脂质体试剂。

空白脂质体

阳离子脂质体载核酸siRNA(LNP)

阳离子脂质体载mRNA(LNP)

阳离子脂质体载质粒DNA制备

靶向肽RGD脂质体的合成

抗体修饰包载siRNA和化疗药的脂质纳米粒子(LNPs)

抗体修饰包载核酸mRNA和化疗药的脂质纳米粒子(LNPs)

靶向颅内胶质瘤iRGD脂质体包裹TMZ化疗药

靶向脂质体包裹小分子药物蛋白

抗体anti-TFR2修饰脂质体,脂质体包裹药物小分子蛋白

脂质体载化疗药物

空载脂质体

靶向叶酸-脂质体包裹活性荧光染料和药物小分子

抗体CD-163修饰包裹siRNA和肿瘤药的脂质纳米粒子(LNPs)

荧光脂质体包裹药物蛋白bmp2

脂质体载ATP及FITC制备

FITC荧光素/活性CY染料/ICG/细胞膜DiD/DIA/DIR脂质体的定制

可以根据客户的需求,提供以下表征:

DLS(Brookhaven ZetaPALS)的粒径和分布

Zeta电位和移动性(Brookhaven ZetaPALS)DEM透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope)cryo-EM冷冻电镜(cryo-electron microscopy)

药物包封效率(通过HPLC或其他分析手段分离和测定的游离药物)

证明抗体偶联上的ζ电位,nanodrop的蛋白测定