基础的流式荧光染料FITC/藻红蛋白/别藻蓝蛋白/苦瓜素叶绿素蛋白简介
发布时间:2022-12-08 分享至:
流式细胞学的发展,重要的促进力量是抗体,其次就是与仪器检测能力配套的荧光染料。流式基本的荧光染料有藻红蛋白PE、别藻蓝蛋白APC、有机小分子FITC。
1、有机小分子
有机小分子其实就是FITC(分子量389 Da)、Alexa Fluor 488(FITC类似物,分子量643 Da)、Texas Red(TxRed,分子量625 Da)、Alexa Fluor 647(分子量1155 Da) 、Pacific Blue(分子量242 Da)和Cy5(分子量762 Da)。
2、藻红蛋白PE
藻胆蛋白(Phycobiliproteins)是从蓝藻、鞭毛藻等藻类中提取的大蛋白分子,例如藻红蛋白(PE)的分子量为240,000 Da。这些蛋白质具有较大的斯托克斯位移(75-200 nm),并且具有稳定的发射光谱。由于藻胆蛋白较大,因此它们在结合过程中通常具有1:1的蛋白质与荧光染料比率,因此对于定量流式细胞术非常有用。
3、别藻蓝蛋白APC
别藻蓝蛋白(Allophycocyanin, APC)是藻胆蛋白的一种,是从蓝绿藻中分离纯化的,能发出强烈的荧光,具有很好的吸光性能和很高的量子产率,在可见光谱区有很宽的激发及发射范围。
4、苦瓜素叶绿素蛋白PerCP
苦瓜素叶绿素蛋白PerCP具有较高的淬灭系数、量子能效和斯托克位移。在488nm它被氩激发激发,伴随着在677nm处出现发射光波峰。PerCP通常用于荧光免疫标记,特别是在荧光激活细胞分拣术(FACS)。