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生物素-链霉亲和素偶联系统介绍

发布时间:2024-01-23 分享至:

生物素-链霉亲和素偶联系统介绍

生物素-链毒亲和素复合物是常用的标记物之一,用于结合生物分子,如蛋白质、脂质和核酸,以及合成分子,如荧光标记。它在样品制备领域取得了巨大成功,作为许多纯化系统的核心部分,并在显微镜和流式细胞术等仪器的许多检测系统中发挥着关键作用。

生物素-链霉亲和素偶联系统

生物素-链霉亲和素偶联系统被广泛使用主要是由于两个因素。首先是生物素和链毒亲和素分子本身的尺寸相对较小,这允许与生物活性大分子(如抗体)结合,而不会对其功能(即抗体的结合位点)产生阻抗。第二个是生物素和链鑫亲和素相互结合的特异性,以及随后结合的强度,这使得流线型的生物测定应用成为可能。链喜亲和素四聚体对生物素具有极高的结合亲和力,其解离常教(Kd)约为 10-14 mol。这种紧密而特异的结合是快速的,并目能够承受极端的 pH 值、温度、有机溶剂和变性试剂。

生物素-链霉亲和素系统的优势是什么?

生物素-链霉亲和素系统的一个主要优点是能够提高检测灵敏度。 这在很大程度上是由于链霉亲和素的四聚体构象。一种链霉亲和素蛋白能够以高亲和力和选择性结合四种生物素分子。这种多样性能够放大弱信号,并通过简单的工作流程提高哺乳,动物细胞或组织中中低丰度目标的检测灵敏度

另一个关键优势是生物素-链毒亲和素系统的多功能性。因为链毒亲和素可以与多种报告标签结合,所以它可以很容易地结合到几乎所有的免疫测定中。例如,链毒亲和素的酶偶联物广泛用于酶联免疫吸附试验(ELISA),而荧光标记的链霉亲和素,如 iFluor 488 链毒亲和素,则广泛用于细胞表面标记、荧光细胞分选(FACS)和其他荧光检测成像应用。