Cy3-NHS酯标记蛋白或抗体后，如何高效纯化?

(1)凝胶过滤层析法：将标记反应液通过大小孔径合适的凝胶过滤柱，用适当的缓冲液洗脱，收集流出液中的Cy3-蛋白标记物，并测定蛋白浓度和荧光强度。这种方法简单快速，但可能会造成一些蛋白损失或稀释。

(2)逆相高效液相色谱法(RP-HPLC)：将标记反应液通过逆相C18柱，用不同比例的水和有机溶剂(如乙腈或甲醇)作为流动相进行梯度洗脱，收集适当的色带峰，冷冻干燥后得到Cy3-蛋白标记物。这种方法可以有效地分离和纯化Cy3-蛋白标记物，但需要专业的仪器和操作技术。以上技术服务重庆新维创生物均可提供。

(3)亲和层析法：如果待标记的蛋白具有特定的亲和性，可以利用亲和层析法进行纯化。例如，如果待标记的蛋白是抗体，可以用蛋白A或蛋白G柱进行纯化;如果待标记的蛋白是GST融合蛋白，可以用谷胱甘肽柱进行纯化。这种方法可以保留蛋白的活性和稳定性，但需要特定的亲和配体和缓冲液。