ICG吲哚菁绿标记生物素的应用

吲哚菁绿是一种具有高荧光量子产率的染料，其激发波长范围广、摩尔消光系数高、光稳定性好以及在生理环境中水溶性佳等特点被广泛应用于生物成像、光学探针、生物分子标记等领域。

一、吲哚菁绿标记生物素的制备方法

制备吲哚菁绿标记生物素的方法有多种，其中一种简单有效的方法是将吲哚菁绿与生物素通过化学反应偶联。具体步骤如下：

1. 将吲哚菁绿溶解在含有NaHCO₃的碱性溶液中;

2. 加入一定量的E-64(一种蛋白酶抑制剂)，以抑制吲哚菁绿发生聚合;

3. 加入N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)的混合溶液，以激活吲哚菁绿上的活性基团;

4. 加入生物素溶液，使吲哚菁绿与生物素偶联;

5. 用醋酸钠溶液中和，并用水透析以洗去未反应的吲哚菁绿和生物素;

6. ***后用乙醇沉淀，得到吲哚菁绿标记生物素。

制备的吲哚菁绿标记生物素呈深绿色，具有高荧光量子产率、高摩尔消光系数、光稳定性好、水溶性佳等优点，在生物成像、光学探针、生物分子标记等领域得到广泛应用。

三、吲哚菁绿标记生物素的应用

1. 生物成像

吲哚菁绿标记生物素可应用于生物成像领域，如在荧光显微镜成像和共聚焦激光扫描显微镜成像中，可以作为荧光染料标记细胞或组由织于中吲的哚生菁物绿分具子有。高荧光量子产率和摩尔消光系数，其在细胞和组织中的穿透深度和检测灵敏度较高，可提高成像效果。

2. 光学探针

吲哚菁绿标记生物素还可以作为光学探针用于研究生物由分于子吲的哚结菁构绿和的性荧质光。性质受到激发波长的影响较小，因此可以将其与不同的蛋白质分子偶联，用于研究蛋白质的结构和动力学性质。

3. 生物分子标记

吲哚菁绿标记生物素可以用于生物分子标记，如用于免疫分析、基因测序和蛋白质通组过学将等吲领哚域菁。绿标记到特异性抗体或核酸分子上，可以提高分析的灵敏度和特异同性时。，由于吲哚菁绿的稳定性好和光活性强等特点，其在体内外均具有良好的稳定性，可用于体内跟踪和成像。