随着流式细胞仪的普及，流式细胞术的应用越来越多，但是流式的应用还局限于四色以内分析，对于多色（6色以上）分析往往掌握不好，其原因是染料搭配不合适，导致各染料之间干扰很大。星戈瑞总结了流式多色染色荧光搭配的六点技巧。

一、选择流式细胞仪能检测的染料

当流式细胞染色确定好指标之后，需要给每个指标对应的抗体配上相应的荧光染料，下表列出了流式细胞仪的激发器和每个激发器对应能检测的染料：

二、强/弱抗原强荧光染料选择

荧光染料亮度有强弱之分，抗原表达有高低区别，因此，对于一些低表达的抗原，我们在搭配对应抗体的染料时，应该选择荧光较亮的染料，而对于高表达的抗原，我们则可选择相对较暗的荧光染料。

三、低/高表达的染料选择

低表达抗原应该选择染料之间有较小干扰的染料（即将弱表达抗原放在被干扰较小的检测通道），强表达抗原应该选择染料之间对其他染料干扰较小的染料（即将强表达抗原放在对其他通道干扰较小的检测通道）。

四、抗原与检测通道选择

表达互相排斥的抗原可以放在相互干扰较大的检测通道，共表达的抗原避免放在相互干扰的通道。

五、抗原检测选择荧光素

胞内抗原的检测需要打孔，让标记荧光素的抗体分子可以进入细胞内，因此有两点要求，打孔试剂对荧光素没有影响；确保荧光素标记的抗体可以进入细胞内，这就要求荧光素标记的抗体分子量尽量小，所以选择小分子应该素，例如PE\ FITC\ APC。 

六、上级抗原检测通道和下级抗原检测通道关系

下级抗原是在上级抗原的基础上分析的，上下级抗原之间尽可能减少荧光之间的干扰，否则会影响圈门分析的结果。