荧光抗体是用于标记的抗体，要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。荧光抗体可分为以下四种方法进行制备：

一 直接法

滴加荧光抗体于待检标本片上，经反应和洗涤后在荧光显微镜下观察。标本中如有相应抗原存在，即与荧光抗体特异结合，在镜下可见有荧光的抗原抗体复合物。

二 间接法

1、将待测抗体加在含有已知抗原的标本片上作用一定时间，洗去未结合的抗体。

2、滴加标记抗体。如果1中的抗原抗体已发生结合，此时加入的标记抗抗体就和已固定在抗原上的抗体(一抗)分子结合，形成抗原-抗体-标记抗体复合物，并显示特异荧光。

三 补体法

在已知抗原标本中加上待测抗体和补体，作用一定时间后，洗去未结合的抗体和补体，再滴加荧光素标记的抗补体抗体，在荧光显微镜下观察。

如果在1中抗原抗体发生特异性结合，则被补体固定，此时加入的标记抗补体抗体即与补体结合形成抗原抗体补体和标记抗补体抗体的大分子免疫复合物，并显示特异荧光。

四 双标记法

用FITC和TBLTC两种荧光素分别标记所需的特异性抗体用于俭测同一标本内的不同抗原。在荧光显微镜下观察时可以同时看见黄绿色和红橙色两种荧光。

这四种方法都是荧光标记抗体的常用方法，其中直接法是较简单、基本的方法；间接法的敏感性较好，不需要制备荧光素标记的抗球蛋白抗体，可用于检测同种动物的多种抗原抗体系统；补体法的结果会生成大分子免疫复合物；双标记法比其他方法来说实验所需两种荧光素标记，准备的材料变多。