包封维生素的纳米脂质体制剂及其制备方法与流程
发布时间：2024-03-29 分享至：
1.本发明涉及医药技术领域，尤其是涉及一种包封维生素的纳米脂质体制剂及其制备方法。
背景技术：
2.维生素d是指一类脂溶性开环甾类化合物，维生素d缺乏与骨关节炎的发生、发展相关，临床试验显示骨关节炎患者补充维生素d可减少膝关节疼痛、增加膝关节功能、保护关节结构。维生素d可能通过多种机制发挥对骨关节炎的保护作用：维生素d可延缓软骨细胞衰老，刺激成熟软骨细胞分泌蛋白多糖(软骨组成成分)并可减少基质金属蛋白酶(一种降解软骨的酶类)的活性；维生素d可通过抑制炎症因子生成及调节t、b细胞稳态等方式发挥抗炎作用(骨关节炎是一种低度炎症疾病)。
3.维生素k是一种脂溶性维生素，天然的维生素k有两种，包括维生素k1(叶绿醌)和维生素k2(甲萘醌)。资料显示老年人群维生素k缺乏的风险***高(骨关节炎主要发生于中老年人群)，维生素k缺乏与骨关节炎的发生、发展相关。临床试验显示补充维生素k可保护维生素k缺乏的老年人群关节结构。作用机制方面，维生素k是γ谷氨酰羧化酶(可催化维生素k依赖蛋白的谷氨酸残基形成γ羟基谷氨酸)的辅因子，维生素k依赖蛋白羧化后方具有功能，而基质γ羟基谷氨酸蛋白(matrix gla protein,mgp)、生长阻滞特异蛋白6(growtharrest-specific protein 6,gas6)、γ羟基谷氨酸富集蛋白(gla‑rich protein,grp)、骨膜蛋白及骨钙蛋白等维生素k依赖蛋白参与了软骨和骨的矿化调节，其中mgp可抑制异位的矿化，羧化的mgp(有功能的mgp)在关节炎软骨中表达下调，mgp缺乏的小鼠出现一系列类似骨关节炎的软骨细胞异常表现，提示维生素k缺乏可能通过减少有功能的mgp等维生素k依赖蛋白在骨关节炎中发挥作用；维生素k具有抗炎作用，动物实验显示维生素k可抑制促炎因子的产生，临床研究显示高水平的维生素k摄入及血清维生素k水平与较低的系统炎症相关，提示补充维生素k可能通过抗炎作用发挥对骨关节炎的保护作用。
4.有研究显示，维生素d3协同维生素k2对治疗骨关节炎有确切的疗效，但是由于维生素d3、维生素k2是脂溶性的，不溶于水，小肠透过性差，普通片剂口服吸收较差，生物利用度低，限制了其临床疗效。而脂质体是目前***成熟的靶向给药体系，能有效提高药物稳定性、降低毒性、减轻变态反应及免疫反应、改变药物体内分布、延缓释放、降低体内消除速度。脂质体(liposome)是一种人工膜，在水中磷脂分子亲水头部插入水中，脂质体疏水尾部伸向空气，搅动后形成双层脂分子的球形脂质体，直径25～1000nm不等。脂质体用于制备药物中，利用脂质体可以和细胞膜融合的特点，将药物送入细胞内部。
5.但是脂质体由流动的动态磷脂膜构成，磷脂不断自由地跨膜交换位置，从而引起脂质体粒子自发地聚集、沉降，磷脂膜不稳定、粒径和zeta电位的变化会造成脂质体物理形态结构的不稳定。由于脂质体在体内外的弱稳定性，产生了一系列问题。体外问题包括：制备工艺不成熟，包封率低，基本理化性质变化，粒子易聚集、融合；磷脂膜不稳定，加剧药物泄露；运输储存成本高；制剂保质期短。体内问题包括:在血液、消化液中易被消除，影响治
疗效果；热不稳定等使药物有突释风险；氧化产物或药物泄露；体内毒性增加。这大大限制了其作为药物载体的应用。因此运用有效、可靠的研究技术和方法，对脂质体制剂学稳定性进行评价十分重要。
6.脂质体长期稳定贮存是脂质体研究的技术难点，只有解决脂质体稳定性问题才能使脂质体成分为产品应用于工业生产。目前***可行的解决的方法是将脂质体做成液体前脂质体或者冻干成固体前脂质体保存。液体前体脂质体的制备将脂质体膜材、药物等溶于分散介质即得。若分散介质为无水乙醇，则形成液晶前体脂质体，其中无水乙醇作为前脂质体组成成分无法从脂质体中去除，以软胶囊方式服用，在体内无法明确其作用机理。有学者认为脂质体对胃肠道内存在的内源性和外源性物质(如胃酸、胆盐、磷脂酶以及食物等)非常敏感，不能直接用于口服。将磷脂、药物及赋形剂等材料用适宜的方法制成固态制剂，使用前加水或药物水溶液，在高于磷脂的相转变温度下再水化得脂质体混悬液。该类前体脂质体处于干燥状态，可在较大程度上避免磷脂和药物的水解，提高贮存稳定性，是研究***多的一类前体脂质体。但是固体前体脂质体制备过程中的质量不易控制，临床服用过程比较麻烦需要患者自行水化搅拌均匀，而仅靠稀释或水合操作制备的脂质体粒径分布不够均匀，影响人体吸收，生物利用度低，无法达到预期效果。
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2.维生素d是指一类脂溶性开环甾类化合物，维生素d缺乏与骨关节炎的发生、发展相关，临床试验显示骨关节炎患者补充维生素d可减少膝关节疼痛、增加膝关节功能、保护关节结构。维生素d可能通过多种机制发挥对骨关节炎的保护作用：维生素d可延缓软骨细胞衰老，刺激成熟软骨细胞分泌蛋白多糖(软骨组成成分)并可减少基质金属蛋白酶(一种降解软骨的酶类)的活性；维生素d可通过抑制炎症因子生成及调节t、b细胞稳态等方式发挥抗炎作用(骨关节炎是一种低度炎症疾病)。
3.维生素k是一种脂溶性维生素，天然的维生素k有两种，包括维生素k1(叶绿醌)和维生素k2(甲萘醌)。资料显示老年人群维生素k缺乏的风险***高(骨关节炎主要发生于中老年人群)，维生素k缺乏与骨关节炎的发生、发展相关。临床试验显示补充维生素k可保护维生素k缺乏的老年人群关节结构。作用机制方面，维生素k是γ谷氨酰羧化酶(可催化维生素k依赖蛋白的谷氨酸残基形成γ羟基谷氨酸)的辅因子，维生素k依赖蛋白羧化后方具有功能，而基质γ羟基谷氨酸蛋白(matrix gla protein,mgp)、生长阻滞特异蛋白6(growtharrest-specific protein 6,gas6)、γ羟基谷氨酸富集蛋白(gla‑rich protein,grp)、骨膜蛋白及骨钙蛋白等维生素k依赖蛋白参与了软骨和骨的矿化调节，其中mgp可抑制异位的矿化，羧化的mgp(有功能的mgp)在关节炎软骨中表达下调，mgp缺乏的小鼠出现一系列类似骨关节炎的软骨细胞异常表现，提示维生素k缺乏可能通过减少有功能的mgp等维生素k依赖蛋白在骨关节炎中发挥作用；维生素k具有抗炎作用，动物实验显示维生素k可抑制促炎因子的产生，临床研究显示高水平的维生素k摄入及血清维生素k水平与较低的系统炎症相关，提示补充维生素k可能通过抗炎作用发挥对骨关节炎的保护作用。
4.有研究显示，维生素d3协同维生素k2对治疗骨关节炎有确切的疗效，但是由于维生素d3、维生素k2是脂溶性的，不溶于水，小肠透过性差，普通片剂口服吸收较差，生物利用度低，限制了其临床疗效。而脂质体是目前***成熟的靶向给药体系，能有效提高药物稳定性、降低毒性、减轻变态反应及免疫反应、改变药物体内分布、延缓释放、降低体内消除速度。脂质体(liposome)是一种人工膜，在水中磷脂分子亲水头部插入水中，脂质体疏水尾部伸向空气，搅动后形成双层脂分子的球形脂质体，直径25～1000nm不等。脂质体用于制备药物中，利用脂质体可以和细胞膜融合的特点，将药物送入细胞内部。
5.但是脂质体由流动的动态磷脂膜构成，磷脂不断自由地跨膜交换位置，从而引起脂质体粒子自发地聚集、沉降，磷脂膜不稳定、粒径和zeta电位的变化会造成脂质体物理形态结构的不稳定。由于脂质体在体内外的弱稳定性，产生了一系列问题。体外问题包括：制备工艺不成熟，包封率低，基本理化性质变化，粒子易聚集、融合；磷脂膜不稳定，加剧药物泄露；运输储存成本高；制剂保质期短。体内问题包括:在血液、消化液中易被消除，影响治
疗效果；热不稳定等使药物有突释风险；氧化产物或药物泄露；体内毒性增加。这大大限制了其作为药物载体的应用。因此运用有效、可靠的研究技术和方法，对脂质体制剂学稳定性进行评价十分重要。
6.脂质体长期稳定贮存是脂质体研究的技术难点，只有解决脂质体稳定性问题才能使脂质体成分为产品应用于工业生产。目前***可行的解决的方法是将脂质体做成液体前脂质体或者冻干成固体前脂质体保存。液体前体脂质体的制备将脂质体膜材、药物等溶于分散介质即得。若分散介质为无水乙醇，则形成液晶前体脂质体，其中无水乙醇作为前脂质体组成成分无法从脂质体中去除，以软胶囊方式服用，在体内无法明确其作用机理。有学者认为脂质体对胃肠道内存在的内源性和外源性物质(如胃酸、胆盐、磷脂酶以及食物等)非常敏感，不能直接用于口服。将磷脂、药物及赋形剂等材料用适宜的方法制成固态制剂，使用前加水或药物水溶液，在高于磷脂的相转变温度下再水化得脂质体混悬液。该类前体脂质体处于干燥状态，可在较大程度上避免磷脂和药物的水解，提高贮存稳定性，是研究***多的一类前体脂质体。但是固体前体脂质体制备过程中的质量不易控制，临床服用过程比较麻烦需要患者自行水化搅拌均匀，而仅靠稀释或水合操作制备的脂质体粒径分布不够均匀，影响人体吸收，生物利用度低，无法达到预期效果。