试剂家总结免疫胶体金标记技术(immunologic colloidal gold signature,ICS)
发布时间:2023-01-14 分享至:
胶体金是分散相粒子的金溶液,经凝聚法制成的金溶胶颗粒表面带有较多电荷,能吸附抗体形成金标记的抗体。用这种金标记抗体与组织或细胞标本中的抗原反应,借助显微镜观察颜色分布即可定位、定性测定组织或细胞中的抗原。该法用于免疫胶体金标记电镜技术,利用胶体金颗粒高电子密度,经衬染后对超微切片中的抗原作定量或定位研究。继后又应用于光镜并根据金催化还原银离子的原理,结合摄影技术以银增强金标抗体的可见性,建立了免疫金银法(IGSS)。
将荧光素吸附于胶体金,在荧光显微镜下作定向性分布及定位观察荧光染色标本,可增强荧光效果。胶体金标记技术发展较快,如胶体金斑点渗滤试验和胶体金斑点免疫层析试验,尤其是后者检测敏感度高,操作简单,时间短,1~2分钟即可出现结果,已应用于HCG和HBV和两对半的检测。
免疫胶体金标记技术试验用的均为干试剂,多个试剂被组合在一狭长的试剂条上,条上端(A)和下端(B)分别为吸水性材料,胶体金标记的特异性抗体干片粘贴在B的近D处,紧接着为硝酸纤维膜,其上有两个反应区域,测试区(T)包被有与待检抗原相应的特异性抗体,对照区(C)包被有对应的抗IgG抗体(二抗)。测试时将试纸下端浸入液体标本中,通过吸水材料虹吸作用吸引标本液向上移动,经过D处时如标本中有与金标抗体相应的抗原,两者即结合,胶体金颗粒发生聚集变为红色。反之则不发生变化。过剩胶体金标记的抗体继续向前,与对照区的二抗结合,出现红色质控条带。